| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | K61007 |
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| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,制藥/生物制藥 |
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MagVigen™ FFPE DNA Extraction Kit
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產品內容
- mag vigen FFPE DNA捕獲納米顆粒
- 組織溶解緩沖液
- 蛋白酶K
- 蛋白酶K緩沖液
- 清洗緩沖液1原液
- 洗脫緩沖液
所需材料
- 異丙醇
- 乙醇
- 磁性架(NVIGEN目錄號A20006)
協議
注意:
- 使用您自己的方案去除FFPE樣本中的石蠟。
- 檢查組織溶解緩沖液，確保沒有沉淀。如果有，加熱到40°C使其溶解。
- 制備清洗緩沖液1溶液:
根據表1計算所需的清洗緩沖液1的量。向每500微升清洗緩沖液1儲備溶液中加入500微升異丙醇。
- 制備蛋白酶K溶液:
向裝有蛋白酶K的試管中加入蛋白酶K緩沖液。輕輕攪拌直至蛋白酶K溶解。將蛋白酶K溶液儲存在-20°C的冰箱中。
- 向FFPE樣品中加入200μl或400μl的細胞溶解緩沖液。遵循表1中的試劑體積。
- 向試管中加入準備好的蛋白酶K溶液，輕輕渦旋以充分混合，并在55°C下孵育30分鐘，冷卻至室溫。
- 在80°C下孵育15分鐘，然后冷卻至室溫。
- 向裂解緩沖液中加入MagVigen DNA捕獲納米顆粒。渦旋混合均勻。
- 向裂解反應中加入異丙醇，渦旋混合
在室溫下孵育45分鐘。
- 將反應管放在磁架上沉淀珠子，直到溶液澄清(約10分鐘)。
- 慢慢去除上層清液。注意不要拿走任何珠子，盡可能多地取出溶液。
- 從磁鐵上取下試管，加入清洗緩沖液1。通過移液或渦旋混合。短暫旋轉，使溶液到達試管底部。在磁性架上沉淀珠子，直到溶液澄清(大約3分鐘)，然后取出溶液。
- 加入洗滌緩沖液2 (80%乙醇)，通過移液混合。短暫旋轉，使溶液到達試管底部。在磁性架上沉淀珠子，等到溶液澄清后取出溶液。
- 重復步驟11，用80%乙醇再清洗一次。
- 將試管放在磁性架上，風干顆粒約1分鐘。
- 向珠子中加入所需量的洗脫緩沖液，上下吸取，直到所有沉淀全重新分散。
- 將試管放在磁性支架上1分鐘。
- 小心地從微量離心管底部收集上清液，不要擾動沉淀。上清液含有提取的DNA。
表1。每個步驟中使用的試劑體積。
| 名字 | 微升 | 微升 |
| 組織溶解緩沖液 | 200 | 400 |
| 蛋白酶K溶液 | 3 | 6 |
| 磁珠 | 3 | 6 |
| 異丙醇 | 200 | 400 |
| 清洗緩沖液1 | 100 | 200 |
| 清洗緩沖液2 / 3 (80%乙醇) | 100 | 200 |
| 洗脫緩沖液 | 20 | 40
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MagVigen™ FFPE DNA Extraction Kit
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