bioenno 復(fù)染套件

復(fù)染試劑盒專門設(shè)計用于對已完成酶組織化學(xué)、免疫組織化學(xué)、原位雜交或高爾基體染色的腦切片進行復(fù)染。它還適用于常規(guī)組織學(xué)切片，包括冷凍和石蠟包埋的組織切片以及培養(yǎng)細胞。該套件提供 3 種復(fù)染溶液（紅色、綠色和紫藍色），可直接從滴管瓶中使用。這些染料溶液的配方使研究人員能夠以較低的背景對細胞元素進行可靠、最特異的染色。

(A) 用甲酚紫溶液復(fù)染切片。免疫反應(yīng)產(chǎn)物（棕色）首先使用 Bioenno DAB 試劑盒開發(fā)。 (B) DAB-Co 試劑盒用于培養(yǎng)免疫反應(yīng)性神經(jīng)元（藍黑色），然后進行中性紅復(fù)染。 (C) 甲基綠復(fù)染。棕色浦肯野細胞使用 DAB 試劑盒進行培養(yǎng)。 (D) DAB 和 BDHC 試劑盒均用于呈現(xiàn)雙標(biāo)記（分別為棕色和藍色），然后進行甲酚紫復(fù)染。 (E,F) Bioenno superGolgi 試劑盒用于對樹突棘進行染色（切片厚度為 150 µm），然后進行甲酚紫 (E) 和中性紅 (F) 復(fù)染。所有圖像均取自成年小鼠的大腦。

試劑盒提供的試劑：

• 甲酚紫：30 毫升溶液裝在滴管瓶中。該溶液配制用于對神經(jīng)元細胞質(zhì)中的尼氏體進行染色。尼氏物質(zhì)（粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)）將被染成紫藍色。

• 甲基綠：30 ml 溶液裝在滴管瓶中。甲基綠是一種核復(fù)染劑，可將細胞核染成淺綠色。該溶液已用氯仿純化。

• 中性紅：30 毫升溶液裝在滴管瓶中。該溶液可用作各種組織學(xué)程序中的紅色核復(fù)染劑。

• 醋酸乙醇：30 ml 分化溶液裝在滴管瓶中。大多數(shù)情況下不需要區(qū)分染色。然而，在此溶液中孵育切片可能有助于消除非特異性背景染色。該溶液含有70%乙醇和0.02%乙酸。

使用說明：

(A) 完成免疫組織化學(xué) (IHC/ICC)、 原位 雜交 (ISH) 或高爾基體染色的切片：

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1. 完成 IHC/ICC、ISH 或高爾基體染色，并將組織切片安裝在粘性顯微鏡載玻片上。在室溫（RT，18-25°C）下風(fēng)干載玻片。

2. 在 0.01 M PBS-T 中清洗干燥載玻片 1-5 分鐘，然后在 dH2O 中沖洗 1-3 秒。

3. 將載玻片放在水平表面上，然后將一種復(fù)染溶液涂抹到切片上。確保這些部分全被溶液覆蓋。根據(jù)所需的強度和組織類型，在 RT 下孵育切片 1-5 分鐘。孵育后，用 dH2O 洗掉多余的復(fù)染溶液。

• 在顯微鏡下檢查染色切片以獲得優(yōu)良結(jié)果。

• 優(yōu)良時間應(yīng)由研究者確定。某些特定組織可能需要更長的孵育時間。

4. 如果需要，區(qū)分試劑盒中提供酸性乙醇或 70% 乙醇幾秒到幾分鐘的切片，并在顯微鏡下檢查以獲得優(yōu)良結(jié)果。用 dH2O 洗掉乙醇。

• 細胞成分和背景的染色強度在酸性乙醇或70%乙醇中快速降低。

• 如果染色較淺，只需重新涂抹復(fù)染溶液并再次孵育切片即可。

5. 將載玻片風(fēng)干，然后直接在 100% 乙醇中脫水切片 1-2 次，每次 3-5 分鐘。在二甲苯或二甲苯替代品中透明，更換2-3次，每次3-5分鐘。使用 Permount® 封固劑蓋玻片。

• 對于較厚的高爾基體染色切片，可能需要更長的脫水和透明時間。

(B) 常規(guī)組織學(xué)切片：

1. 切片應(yīng)安裝在明膠包被的或帶正電的載玻片上。石蠟包埋切片在染色前應(yīng)脫蠟。

2. 風(fēng)干切片/載玻片。在 0.01 M PBS-T 中清洗載玻片 1-5 分鐘，然后在 dH 2 O 中沖洗 1-3 秒。

3. 如上所述，在一種復(fù)染溶液中染色 1-5 分鐘。

4. 如果需要，可在酸性乙醇或 70% 乙醇中分化幾秒至幾分鐘，并在顯微鏡下檢查以獲得優(yōu)良結(jié)果。

5. 在 100% 乙醇中脫水，在二甲苯或二甲苯替代品中澄清，并用如上所述的非水封固劑蓋玻片。

儲存、安全和操作注意事項：

• 將套件存放在 2-25°C 下，并避免強直射光。

• 該試劑盒僅供體外研究使用，不適用于藥物、診斷或其他用途。

• 該試劑盒含有與皮膚接觸、吸入或攝入可能有害的試劑。請勿用嘴移液。使用普通預(yù)防措施避免吸入以及接觸皮膚和眼睛。如果接觸，請立即用大量水清洗并就醫(yī)。如果吞咽，請用水漱口并立即就醫(yī)。

• 在化學(xué)罩下進行實驗。處理試劑盒試劑時，請穿戴合適的防護服、手套和眼睛/面部防護裝置。進行實驗后洗手。

• 可根據(jù)要求提供材料安全數(shù)據(jù)表 (MSDS)。

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