化學(xué)發(fā)光是一種伴隨化學(xué)反應(yīng)的發(fā)光現(xiàn)象。 化學(xué)發(fā)光底物，也稱為化學(xué)發(fā)光劑，是在化學(xué)反應(yīng)中傳遞能量并以光的形式釋放能量的試劑。化學(xué)發(fā)光底物是檢測蛋白質(zhì)和核酸的重要工具。常用的化學(xué)發(fā)光劑有三種：酶促反應(yīng)用發(fā)光底物的發(fā)光劑、直接化學(xué)發(fā)光劑和電化學(xué)發(fā)光劑。這些物質(zhì)具有一些共同特征：

1. 它們可以參與化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，具有很高的發(fā)光量子產(chǎn)率。

2. 它們可以與抗原或抗體偶聯(lián)并形成穩(wěn)定的偶聯(lián)物。

3. 它們不會改變或很少改變標志物的物理和化學(xué)性質(zhì)，尤其是免疫活性。

4. 其應(yīng)用的濃度范圍不應(yīng)對生物體有毒

用于酶促反應(yīng)的發(fā)光底物的發(fā)光劑

酶催化發(fā)光反應(yīng)是一種通過酶的降解發(fā)光的反應(yīng)。從技術(shù)上講，它是一種酶聯(lián)免疫測定法，使用發(fā)光化學(xué)物質(zhì)作為底物而不是顯色劑。 使用廣泛的酶是辣根過氧化物酶（HRP）和堿性磷酸酶（ALP）。HRP可與基材魯米諾及其衍生物一起使用，或 p-羥基苯y(tǒng)i酸（p-HPA）。堿性磷酸酶可與底物金剛烷基1，2-二氧雜環(huán)丁烷芳基磷酸酯（AMPPD）或4-甲基傘形磷酸酯（4-MUP）一起使用。

直接化學(xué)發(fā)光劑

直接化學(xué)發(fā)光劑直接參與發(fā)光反應(yīng)。它們在化學(xué)結(jié)構(gòu)中具有特定的基團，可以通過簡單地改變?nèi)芤旱膒H值而不是酶促反應(yīng)來發(fā)光。吖啶酯（AE）是目前常用的直接化學(xué)發(fā)光劑，具有穩(wěn)定性高、背景低、信噪比高、發(fā)光快、發(fā)光效率高等優(yōu)點。

電化學(xué)發(fā)光劑

電化學(xué)發(fā)光是在電極上產(chǎn)生的物質(zhì)形成激發(fā)態(tài)并通過電子轉(zhuǎn)移反應(yīng)發(fā)光的過程。電化學(xué)發(fā)光劑不直接參與化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，主要用作能量轉(zhuǎn)移的催化劑或載體。這種藥劑的典型代表是釕（II）三（聯(lián)吡啶）2+ 3 NHS酯。電化學(xué)發(fā)光工藝既可以提高反應(yīng)底物的穩(wěn)定性，又可以增強靈敏度。

根據(jù)化學(xué)發(fā)光底物的特性，科學(xué)家開發(fā)了一種稱為化學(xué)發(fā)光免疫測定（CLIA）的先進技術(shù)。 CLIA具有廣泛的應(yīng)用。它不僅可以定量或定性地檢測抗原、半抗原和抗體，還可以檢測核酸探針。與放射免疫測定（RIA）、免疫熒光測定（IFA）和酶免疫測定（EIA）相比，CLIA具有無輻射、標記物有效期長、自動化程度高等優(yōu)點。因此，CLIA被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品檢測等科學(xué)研究。